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HybriDetect試紙條檢測(cè)DNA 和RNA的特異性-技術(shù)

發(fā)布時(shí)間: 2020-06-12  點(diǎn)擊次數(shù): 2550次

用CRISPR/Cas12或Cas13新技術(shù)檢測(cè)DNA或RNA序列的特異性,通過(guò)酶識(shí)別一個(gè)特定的目標(biāo)序列,與該序列結(jié)合后,其核酸內(nèi)切酶活性被激活,并切割任何報(bào)告序列。該項(xiàng)技術(shù)可以很容易地與側(cè)流雜交檢測(cè)試紙條相結(jié)合,以顯示結(jié)果。

SHERLOCK

用CRISPR核酸酶進(jìn)行核酸檢測(cè),博德研究所(Broad Institute)的研究人員近發(fā)表了一篇關(guān)于基于CRISPR的診斷平臺(tái)的文章,該平臺(tái)將核酸預(yù)擴(kuò)增與CRISPR-Cas酶學(xué)相結(jié)合,用于特定識(shí)別所需的DNA或RNA序列。所述技術(shù)稱(chēng)為SHERLOCK(specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking特異性高靈敏度酶報(bào)告解鎖)方法。這種方法可以很容易地與側(cè)流雜交檢測(cè)試紙條相結(jié)合,以快速顯示結(jié)果。CRISPR/Cas酶Cas12或Cas13通過(guò)與特定靶點(diǎn)結(jié)合而被激活。當(dāng)被激活時(shí),內(nèi)切酶能夠切割非特異性的報(bào)告物。一個(gè)簡(jiǎn)單的、無(wú)儀器和便攜式的LFA(lateral flow assay側(cè)流分析)雜交檢測(cè)試紙條方法讀出SHERLOCK結(jié)果。

SARS-CoV-2 檢測(cè)

布勞頓(Broughton et al.)等人開(kāi)發(fā)了一種與CRISPR-Cas12相關(guān)的檢測(cè)方法,用于在30分鐘內(nèi)從患者RNA中檢測(cè)SARS-CoV-2,稱(chēng)為DETECTR。

上游反轉(zhuǎn)錄(RT)與環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)同時(shí)進(jìn)行(RT-LAMP)。之后,進(jìn)行Cas12特異性病毒序列檢測(cè)和報(bào)告分子的裂解。后一步是通過(guò)我們的側(cè)流雜交試紙條檢測(cè)進(jìn)行可視化。它的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要任何儀器就能顯示出快速的結(jié)果。

默瑞生物

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